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Tipo: Trabalho de Conclusão de Curso
Título: DIFICULDADES E LIMITACÕES EM TESTE SOROLÓGICO E MOLECULAR UTILIZADOS PARA DIAGNOSE VIRAL EM Solanum lycopersicon
Título(s) alternativo(s): DIFFICULTIES AND LIMITATIONS IN SEROLOGICAL AND MOLECULAR TEST USED FOR VIRAL DIAGNOSIS IN Solanum lycopersicon
Autor(es): Neves, Elias Luiz
Primeiro Orientador: Silveira, Ricardo Diogenes Dias
Primeiro Membro da Banca: Freitas, Marco Antonio Moreira
Segundo Membro da Banca: Fonseca, Rafaela Souza Alves
Terceiro Membro da Banca: Evangelista, Cleberly
Resumo: A cultura do tomateiro destaca- se como uma das solanáceas de maior produtividade tanto no Brasil quanto no mundo. Sua importância está relacionada tanto a questões nutricionais, quanto socioeconômicas. Entretanto, vários problemas podem ocasionar perdas severas na produtividade de tal cultura, destacando-se a suscetibilidade por infecções virais, geralmente transmitidas por insetos vetores. Nosso objetivo foi realizar diagnose de gêneros de vírus fitopatogênicos em amostras de tomate sintomáticas presentes em uma área produtora de tomate no Núcleo Rural Taquara, Planaltina DF, utilizando o teste sorológico (Dot-ELISA) e Molecular (RT PCR). Assim também, relatar acerca das dificuldades e limitações encontradas no decorrer da pesquisa Amostras foliares de tomate sintomáticas para fitoviroses foram coletadas em área de produtor rural no Núcleo rural Taquara DF. No total, Trinta e seis amostras foram levadas para o Laboratório de Virologia vegetal a fim de realizar os testes de diagnose viral. O primeiro teste realizado foi o teste sorológico Dot-ELISA, na qual foram utilizados anticorpos específicos PVY e PEPMV para detecção de Potyvirus e GRSV TCSV, TSWV para detecção de Orthotospovirus. Das Trinte e seis amostras, apenas sete reagiram para os anticorpos utilizados na detecção de Potyvirus, Já em relação aos anticorpos utilizados para detecção de Orthotospovirus apenas quatro amostras reagiram, sendo assim positivas. O RNA viral de todas as amostras que tinham dado positivas no teste sorológico foi extraído pelo método TRizol® a fim de realizar a detecção molecular. Em seguida, realizou-se uma Transcrição Reversa a fim de produzir DNA complementar, seguida de uma RT-PCR utilizando primers específicos, para detectar Potyvirus e Orthotospovirus. O resultado do teste molecular não foi o esperado, pois observamos a ausência de bandas nos géis, e não amplificação do produto de PCR. Assim foi necessário realizar um novo teste, com outras amostras, para fins de comparação. Com isso, nosso trabalho evidencia, ambos os testes de detecção possuem algumas limitações, sendo necessário cuidados essenciais para que possamos obter os resultados eficazes.
Abstract: The tomato crop stands out as one of the most productive nightshades both in Brazil and in the world. Its importance is related to both nutritional and socioeconomic issues. However, several problems can cause severe losses in the productivity of such culture, highlighting the susceptibility to viral infections, usually transmitted by vector insects. Our objective was to carry out diagnosis of phytopathogenic virus genera in symptomatic tomato samples present in a tomato-producing area in Núcleo Rural Taquara, Planaltina DF, using serological (Dot-ELISA) and Molecular (RT PCR) tests. Also, report on the difficulties and limitations encountered during the research Tomato foliar samples symptomatic for phytoviruses were collected in a rural producer's area in the rural Nucleus Taquara DF. In total, Thirty-six samples were taken to the Laboratory of Plant Virology in order to carry out viral diagnostic tests. The first test performed was the Dot-ELISA serological test, in which specific antibodies PVY and PEPMV were used for detection of Potyvirus and GRSV TCSV, TSWV for detection of Orthotospovirus. Of the thirty-six samples, only seven reacted to the antibodies used in the detection of Potyvirus. In relation to the antibodies used for the detection of Orthotospovirus, only four samples reacted, thus being positive. Viral RNA from all samples that tested positive in the serological test was extracted by the TRizol® method in order to carry out molecular detection. Then, a Reverse Transcription was performed in order to produce complementary DNA, followed by an RT-PCR using specific primers, to detect Potyvirus and Orthotospovirus. The result of the molecular test was not what was expected, as we observed the absence of bands in the gels, and no amplification of the PCR product. Thus, it was necessary to carry out a new test, with other samples, for comparison purposes. Thus, our work shows that both detection tests have some limitations, requiring essential care so that we can obtain effective results.
Palavras-chave: Diagnose viral
Solanum lycopersicon
Limitações
Área do CNPq: CIENCIAS BIOLOGICAS
Idioma: por
Pais: Brasil
Editor: Instituição extra IF Goiano
Sigla da Instituição: IF Goiano
Campus: Campus Urutaí
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
URI: https://repositorio.ifgoiano.edu.br/handle/prefix/2902
Data do documento: 27-Set-2022
Aparece nas coleções:Licenciatura em Ciências Biológicas

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